Вероятно, родился в Саффолке, Англия. Работал в должности старшего садовника у графа Солсбери. В 1610 тот отправил Джона Традесканта в его первое путешествие — в Нидерланды за фруктовыми деревьями.
В 1615—1623 занимался проектированием садов на территории аббатства святого Августина (англ. St Augustine's Abbey).
В 1618 Джон Традескант побывал в российской Арктике — в Николо-Корельском монастыре на Белом море (современный Северодвинск). Он стал первым учёным, который занимался описанием флоры России.
В 1620 вместе с экспедицией, отправленной на борьбу с пиратами, был в Леванте и Алжире.
Позже он работал садовником у Джорджа Вильерса, первого герцога Бекингема, фаворита короля, министра, занимаясь переоборудованием его садов. По заданию герцога в 1624 он снова ездил в Нидерланды. Вместе с герцогом он ездил в Париж, а также участвовал в качестве инженера в неудачной военной кампании английских войск на острове Ре (фр. Île de Ré) с целью снятия осады Ла-Рошели (1627). После того, как герцог Бекингем в 1628был убит, в 1630 Джон Традескант был неожиданно назначен королём на должность хранителя садов, виноградников и шелкопряда Его Величества во дворце в Суррее.
